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高粱原生質(zhì)體的制備及轉(zhuǎn)化方法研究

作者:謝鑫; 蔣君梅; 王勇; 任明見(jiàn) 貴州大學(xué)農(nóng)學(xué)院; 貴陽(yáng)550025; 國(guó)家小麥改良中心貴州分中心; 貴陽(yáng)550025

摘要:以高粱幼苗為材料,利用1%的纖維素酶Cellulose R10和0.75%的果膠酶Macerozyme R10處理高粱幼莖,對(duì)比不同的酶解時(shí)間,發(fā)現(xiàn)酶解7h原生質(zhì)體濃度最高、質(zhì)量最佳。以經(jīng)過(guò)氯化銫密度梯度離心法獲得的高純度質(zhì)粒對(duì)獲得的原生質(zhì)體進(jìn)行轉(zhuǎn)化,用激光共聚焦進(jìn)行熒光觀(guān)察,結(jié)果顯示,GFP和YFP在全細(xì)胞表達(dá)。本研究首次建立了高粱以高粱幼莖為材料的原生質(zhì)體制備及轉(zhuǎn)化體系,其方法簡(jiǎn)單、高效,可以用于高粱基因功能研究。

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