摘要:采用RACE技術(shù)從紫丁香(Syringa oblata Lindl.)花中克隆獲得查爾酮異構(gòu)酶基因(CHI)的cDNA全長序列,命名為SoCHI,其編碼的蛋白質(zhì)為SoCHI蛋白。序列分析結(jié)果表明:SoCHI基因的開放閱讀框(ORF)長度為684bp,編碼227個氨基酸殘基,并且,該基因全部由外顯子構(gòu)成,無內(nèi)含子。SoCHI蛋白理論相對分子質(zhì)量24 988,理論等電點p I 5.53,不穩(wěn)定系數(shù)為47.58,平均親水指數(shù)為-0.096,并包含2個氫鍵結(jié)合位點、2個活性催化位點和7個底物結(jié)合位點;在該蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)中,α-螺旋、延伸鏈和無規(guī)則卷曲分別占該蛋白質(zhì)氨基酸殘基總數(shù)的31.7%、20.3%和48.0%。同源性比對結(jié)果表明:紫丁香與其他9種植物CHI蛋白的同源性很高(均在76%以上),與同科[木犀科(Oleaceae)]植物桂花(Osmanthus fragrans Lour.)和油橄欖(Olea europaea Linn.)CHI蛋白的同源性更高(達88%)。實時熒光定量PCR擴增結(jié)果表明:SoCHI基因的相對表達量在紫丁香的嫩葉中最高,在成熟葉中次之;該基因的相對表達量在紫丁香花發(fā)育過程中先上升后下降,并在花蕾期達到最高。研究結(jié)果顯示:SoCHI基因編碼的氨基酸序列相對保守,且其表達與紫丁香花呈色關(guān)系密切。
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