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miR-429在食管鱗癌中的表達及對細胞增殖遷移的影響

作者:花光斌; 朱國璽; 蘇煜強 河南省焦作市焦煤集團中央醫(yī)院心胸外科; 焦作454000

摘要:目的探討微小RNA-429(miR-429)在食管鱗癌(ESCC)中的表達及其對細胞增殖及遷移的影響。方法選取本院45例ESCC患者手術切除的癌組織(ESCC組)及癌旁組織(正常組)標本為研究對象,并采用實時熒光定量(qRT-PCR)檢測兩組miR-429表達水平。體外培養(yǎng)ESCC癌細胞株系ECa109及人正常食管上皮細胞株Het-1A,將轉染試劑、miR-429陰性對照質(zhì)粒、miR-429 mimic質(zhì)粒分別轉染ECa109細胞,命名為空白組、陰性轉染組、miR-429過表達組,同時應用生物信息學工具預測miR-429的靶基因為CTl0激酶調(diào)節(jié)子樣蛋白(CRKL),熒光素酶活性檢測miR-429與CRKL的靶向調(diào)控關系。采用qRT-PCR法檢測細胞中miR-429與CRKL mRNA表達水平,蛋白免疫印跡法檢測細胞中CRKL蛋白表達。MTT法檢測細胞增殖情況,Transwell檢測細胞遷移能力。結果與正常組相比,ESCC組miR-429表達水平顯著降低(P﹤0.05);熒光素酶活性測定顯示3'UTR-Wt細胞中miR-429過表達組熒光素酶活性顯著低于陰性對照組(P﹤0.05),3'UTR-Mut細胞中miR-429陰性轉染組與過表達組比較差異無統(tǒng)計學意義(P﹥0.05);與Het-1A細胞相比,ECa109細胞中miR-429表達水平顯著降低(P﹤0.05),而CRKL mRNA及蛋白表達水平顯著升高(P﹤0.05);與空白組、陰性轉染組相比,miR-429過表達組miR-429表達水平顯著升高(P﹤0.05),而CRKL mRNA及蛋白表達水平顯著降低(P﹤0.05);與空白組、陰性轉染組相比,miR-429過表達組細胞增殖率及遷移數(shù)量均顯著降低(P﹤0.05)。結論ESCC中miR-429呈低表達,其可通過下調(diào)CRKL表達進而抑制ESCC細胞增殖及遷移。

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