摘要：目的研制安全有效的腸道病毒71型(enterovirus 71,EV-A71)滅活疫苗,預(yù)防EV-A71感染所致疾病.方法通過(guò)比較不同臨床EV-A71分離毒株免疫家兔后的免疫原性和細(xì)胞傳代適應(yīng)性,篩選EV-A71滅活疫苗生產(chǎn)毒株;建立多步層析純化工藝,獲得高純度、高比活EV-A71抗原;采用隨機(jī)雙盲、多中心、試驗(yàn)疫苗與安慰劑對(duì)照優(yōu)效性設(shè)計(jì)方案,在6~35月齡健康嬰幼兒中接種2劑、3個(gè)批次EV-A71疫苗,觀察對(duì)照組和疫苗組EV-A71及其他腸道病毒感染所致疾病發(fā)生病例數(shù),計(jì)算疫苗保護(hù)效果.分析疫苗免疫原性、批間一致性和交叉免疫原性.結(jié)果依據(jù)中和抗體水平將087株確定為疫苗生產(chǎn)株.經(jīng)超濾濃縮、柱層析純化后,疫苗抗原目的蛋白純度達(dá)95%以上、比活達(dá)800U/μg以上.第一年內(nèi)疫苗對(duì)EV-A71所致住院/重癥病例保護(hù)率為100.00%、對(duì)EV-A71所致手足口病保護(hù)率為90.93%、對(duì)EV-A71感染所致疾病保護(hù)率為81.85%;兩年內(nèi)對(duì)EV-A71感染所致手足口樣疾病、手足口病的保護(hù)率達(dá)到95.00%,對(duì)EV-A71感染所致皰疹性咽峽炎、皰疹性口腔炎保護(hù)率達(dá)100.00%,對(duì)EV-A71感染所致住院/重癥病例保護(hù)率達(dá)100.00%;但對(duì)CV-A16及除EV-A71、CV-A16外其他腸道病毒所致疾病未顯現(xiàn)出明顯的交叉保護(hù)作用.免疫前中和抗體陰性人群,EV-A71疫苗免疫后第56天,EV-A71中和抗體陽(yáng)轉(zhuǎn)率達(dá)到91.7%以上,中和抗體幾何平均滴度(geometric mean titer,GMT)達(dá)到325.3.3批次試驗(yàn)疫苗接種人群間首針免疫后第56天GMT比值的95%可信區(qū)間均在等效區(qū)間0.67~1.5內(nèi),提示3個(gè)批次試驗(yàn)疫苗具有較好的一致性.結(jié)論EV-A71疫苗對(duì)EV-A71感染所致疾病具有較好的保護(hù)效果.