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冷凍切片免疫組化染色最佳固定條件探討

作者:王璇; 吳楠; 章如松; 魏雪; 楊萬(wàn)銳; 饒秋; 馬恒輝 東部戰(zhàn)區(qū)總醫(yī)院(原南京軍區(qū)南京總醫(yī)院)病理科; 南京210002

摘要:目的分析不同固定液及固定時(shí)間對(duì)冷凍切片免疫組化染色的影響,尋找冷凍切片免疫組化染色最佳固定條件。方法收集新鮮送檢的乳腺、肺、甲狀腺手術(shù)切除標(biāo)本共15例,冷凍切片后分別置于4種不同固定液(冷丙酮、95%乙醇、4%中性甲醛液、AAF液)中固定5 min和2 h,并對(duì)經(jīng)4%中性甲醛液和AAF液固定的各2張切片進(jìn)行熱修復(fù),根據(jù)組織含有的特定抗原進(jìn)行相應(yīng)抗體的免疫組化染色。結(jié)果采用4種不同固定液固定冷凍切片,均可滿足快速病理診斷的需要,但染色細(xì)節(jié)存在差異;從5個(gè)方面綜合分析,AAF液的染色效果優(yōu)于其他3種固定液,其次為95%乙醇、4%中性甲醛、冷丙酮;就陽(yáng)性強(qiáng)度而言,冷丙酮最強(qiáng),其次為AAF液、4%中性甲醛、95%乙醇;冷凍切片固定5 min和2 h,除固定2 h陽(yáng)性強(qiáng)度略強(qiáng)于固定5 min外,其他方面均無(wú)明顯差異;4%中性甲醛液固定的切片經(jīng)熱修復(fù)后與未修復(fù)相比組織脫片破損嚴(yán)重,組織結(jié)構(gòu)不清晰,但細(xì)胞恢復(fù)正常大小;AAF液固定的切片經(jīng)熱修復(fù)后與未修復(fù)相比有輕微脫片,其他方面無(wú)明顯差異。結(jié)論冷凍切片進(jìn)行免疫組化染色,AAF液的固定效果優(yōu)于其他3種固定液;采用AAF液對(duì)冷凍切片固定5 min且不修復(fù),整體操作時(shí)間短、染色效果好,是冷凍切片免疫組化染色非常理想的固定條件。

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診斷病理學(xué)

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