摘要：為探究miR-18a對豬卵巢顆粒細胞凋亡的調(diào)控作用,利用生物信息學分析、熒光素酶活性檢測和體外培養(yǎng)顆粒細胞試驗驗證miR-18a對CTGF的靶向作用及其在豬顆粒細胞中對CTGF基因表達的影響,并通過流式細胞技術(shù)檢測其對豬卵巢顆粒細胞凋亡的調(diào)控作用。生物信息學分析結(jié)果表明,CTGF是miR-18a的潛在靶基因,熒光素酶活性檢測進一步驗證了miR-18a與CTGF的結(jié)合。在培養(yǎng)的顆粒細胞中轉(zhuǎn)染miR-18a模擬物后,qRT-PCR和Western blot結(jié)果顯示CTGF的mRNA和蛋白水平均顯著降低,流式細胞技術(shù)檢測表明miR-18a顯著促進顆粒細胞的凋亡。而轉(zhuǎn)染miR-18a抑制劑后,豬顆粒細胞的凋亡率顯著降低,共轉(zhuǎn)染miR-18a抑制劑和CTGF的干擾RNA后,顆粒細胞的凋亡率呈現(xiàn)回升。試驗結(jié)果表明miR-18a通過靶向結(jié)合CTGF基因調(diào)控豬顆粒細胞的凋亡。