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Vero細(xì)胞培養(yǎng)A/Shanghai/02/2013(H7N9)Va流感病毒適宜條件研究

作者:非成瑞; 馬磊; 高菁霞; 崔兆海; 宋紹輝; 李衛(wèi)東; 廖國(guó)陽(yáng) 中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院、北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究所; 云南昆明650118

摘要:目的:優(yōu)化Vero細(xì)胞培養(yǎng)H7N9流感病毒的培養(yǎng)條件,建立細(xì)胞培養(yǎng)病毒高產(chǎn)培養(yǎng)系統(tǒng)。方法:采用不同病毒接種MOI、培養(yǎng)溫度、pH值和TPCK胰酶等條件優(yōu)化培養(yǎng)H7N9流感病毒Vero細(xì)胞適應(yīng)株A/Shanghai/02/2013(H7N9)Va的條件,并將其連續(xù)傳代后擴(kuò)大至細(xì)胞工廠大規(guī)模培養(yǎng)。結(jié)果:Vero細(xì)胞高產(chǎn)H7N9流感病毒培養(yǎng)條件為DMEM/F12和MEM以1∶1混合,并添加0.3mg/mL牛血清白蛋白、1%谷氨酰胺、0.5%雙抗和1.5μg/mLTPCK胰蛋白酶,pH為7.4時(shí),連續(xù)傳代病毒血凝效價(jià)保持在512,擴(kuò)大至細(xì)胞工廠大規(guī)模培養(yǎng)病毒產(chǎn)量穩(wěn)定。結(jié)論:建立的Vero細(xì)胞培養(yǎng)H7N9流感病毒條件,能夠持續(xù)穩(wěn)定高產(chǎn),并適用于細(xì)胞工廠大規(guī)模培養(yǎng),有望用于H7N9流感細(xì)胞疫苗的大規(guī)模制備。

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