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D-泛解酸內(nèi)酯水解酶的固定化及酶學(xué)性質(zhì)

作者:王開放; 張梁; 辛瑜; 曾偉; 丁重陽; 石貴陽 江南大學(xué)糧食發(fā)酵工藝與技術(shù)國(guó)家工程實(shí)驗(yàn)室; 江蘇無錫214122; 江南大學(xué)生物工程學(xué)院; 江蘇無錫214122; 大連韋德生化科技有限公司; 遼寧大連116000

摘要:為有效提高D-泛解酸內(nèi)酯水解酶的利用效率,筆者選擇合適的載體對(duì)酶進(jìn)行固定化,在優(yōu)化固定化條件的同時(shí)研究固定化酶的最佳反應(yīng)條件和酶學(xué)性質(zhì)。結(jié)果表明,選擇的最佳固定化載體為樹脂D380,最佳固定化條件為:酶的吸附添加量為30 U(以1 g濕樹脂計(jì)),吸附pH 7.0,吸附溫度30℃,吸附時(shí)間5 h,戊二醛體積分?jǐn)?shù)0.1%,交聯(lián)時(shí)間1 h。在最優(yōu)條件下得到的固定化酶的比酶活為(11.5±0.12) U/g。固定化酶的最適反應(yīng)溫度為37℃,最適反應(yīng)pH為7.5。游離酶和固定化酶的動(dòng)力學(xué)常數(shù)Km分別為170.25和207.60 mmol/L。Ca2+對(duì)酶促反應(yīng)有激活作用,Mn2+對(duì)該酶有較強(qiáng)的抑制作用。

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