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磷脂酰膽堿特異性和磷脂酰肌醇特異性磷脂酶C酶學(xué)性質(zhì)及其在油脂脫膠中的應(yīng)用

作者:鄒權(quán); 陳圣; 嚴(yán)明 南京工業(yè)大學(xué)生物與制藥工程學(xué)院; 江蘇南京211800

摘要:通過基因工程方法將具有磷脂酰膽堿(PC)、磷脂酰乙醇胺(PE)特異性磷脂酶C(PC-PLC)和磷脂酰肌醇(PI)特異性磷脂酶C(PI-PLC)基因分別在枯草芽孢桿菌WB800中進(jìn)行胞外表達(dá)。對2種重組蛋白粗酶的酶學(xué)性質(zhì)進(jìn)行研究,并探究其用于油脂脫膠中的效果。結(jié)果表明:PC-PLC和PI-PLC均在30~45℃和中性偏酸的條件下具有較好的穩(wěn)定性,2 h后殘余活性仍在60%以上。Zn2+、Mg2+對PC-PLC的活性有促進(jìn)作用,而Ca2+對PI-PLC的活性有促進(jìn)作用。油脂脫膠研究結(jié)果表明,PC-PLC的最適脫膠條件為50℃、pH 6.0、反應(yīng)2 h、酶添加量為80 mg/kg;PI-PLC的最適脫膠條件為45℃、pH 7.0、反應(yīng)2 h、酶添加量為60 mg/kg。PC-PLC和PI-PLC聯(lián)合脫膠實(shí)驗(yàn)中大豆毛油中磷含量從531 mg/kg降至4.1 mg/kg,此時(shí)甘油二酯(DAG)含量增加0.95%。

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