摘要:以枯草芽孢桿菌芽孢皮層裂解酶為研究對象,研究中溫結(jié)合乙醇處理對其活性及結(jié)構(gòu)的影響。采用紫外可見分光光度法測定酶活性,熒光光譜和傅立葉變換紅外光譜法(fourier transform infrared spectroscopy,FTIR)分析處理前后酶二三級結(jié)構(gòu)的變化。結(jié)果表明,80℃結(jié)合體積分數(shù)為30%、75%乙醇處理20 min時,殺滅芽孢效果最佳,皮層裂解酶活性最弱,僅為(24.3±2.73)、(20.42±2.17)U/L。中溫結(jié)合乙醇處理使皮層裂解酶熒光強度下降,80℃時紅移3 nm,三級結(jié)構(gòu)發(fā)生變化。隨著溫度和乙醇體積分數(shù)逐漸增加,二級結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,α-螺旋及β-折疊含量減少、無規(guī)卷曲含量顯著增加,75%(體積分數(shù))乙醇80℃處理時變化最顯著,含量分別為(10.98±0.03)%、(25.41±0.03)%、(48.24±0.06)%、(15.37±0.02)%。中溫結(jié)合乙醇處理后皮層裂解酶結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,從而導(dǎo)致酶活力的改變。
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