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濃香型白酒窖泥中梭菌的分離、鑒定及產(chǎn)丁酸性能的比較研究

作者:田雨思; 衡小成; 鄒偉; 葉光斌 四川輕化工大學(xué)生物工程學(xué)院; 四川宜賓644000; 釀酒生物技術(shù)及應(yīng)用四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室; 四川宜賓644000

摘要:為了研究窖泥來(lái)源的23株梭菌微生物的分類(lèi)信息和揮發(fā)性代謝產(chǎn)物的差異,通過(guò)厭氧富集培養(yǎng)法從濃香型白酒窖泥內(nèi)分離獲得微生物,并比較不同菌株16S r DNA序列和系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)分析其分類(lèi)地位,將不同微生物在RCM液態(tài)培養(yǎng)基內(nèi)35℃厭氧培養(yǎng)5 d,其發(fā)酵液通過(guò)自動(dòng)進(jìn)樣-氣相色譜-質(zhì)譜法(SPME-GC-MS)分析其可揮發(fā)代謝產(chǎn)物。分離得到的23株細(xì)菌分別與5類(lèi)梭菌--拜氏梭菌菌群(Clostridium beijerinckii)、丁酸梭菌(C.butyricum)、還原鉻梭菌(C.chromiireducens)、酪丁酸梭菌(C.tyrobutyricum)、廣西梭菌(C.guangxiense)具有較高的序列同源性。其中拜氏梭菌菌群是一個(gè)包括C.beijerinckii、C.diolis、C.saccharobutylicum、C.chromiireducens、C.puniceum、C.saccharoperbutylacetonicum 6個(gè)16S r DNA序列相似度超過(guò)97%的同屬近似種組成的菌群,與其近似的相關(guān)菌株基于16S rDNA序列難以鑒定到種。氣質(zhì)分析結(jié)果共檢測(cè)到包括醇類(lèi)、酯類(lèi)、酸類(lèi)等16種風(fēng)味物質(zhì),且主要代謝產(chǎn)物為丁酸。研究表明,在濃香型白酒窖泥內(nèi)存在比人們預(yù)估更多的梭菌類(lèi)群,同時(shí)不同梭菌在產(chǎn)丁酸能力上存在明顯差異。

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