摘要：【目的】探究GalDH和GalLDH在甜櫻桃果實(shí)AsA生物合成中的作用?！痉椒ā勘狙芯恳蕴饳烟摇籼馘\’(Satonishiki)果實(shí)為材料,采用改良CTAB法提取總RNA,運(yùn)用RT-PCR法,克隆并分析了抗壞血酸L-半乳糖合成途徑PacGalDH和PacGalLDH基因的cDNA全長(zhǎng)序列。此外,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析了兩基因在甜櫻桃果實(shí)發(fā)育過(guò)程的表達(dá)?！窘Y(jié)果】獲得了1 253 bp長(zhǎng)的PacGalDH cDNA序列,其中含有975 bp完整的開(kāi)放閱讀框(ORF),編碼324個(gè)氨基酸殘基。獲得了1 914 bp長(zhǎng)的PacGalLDH c DNA序列,含有1 791 bp完整的ORF,編碼596個(gè)氨基酸。通過(guò)氨基酸序列比對(duì)發(fā)現(xiàn),PacGalDH和PacGalLDH氨基酸序列均與梅和桃對(duì)應(yīng)的氨基酸序列具有較高的同源性,達(dá)98%。實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析表明,PacGalDH和PacGalLDH在甜櫻桃果實(shí)不同發(fā)育階段均有表達(dá),均在花后10 d達(dá)到最大表達(dá)量,隨后逐漸下降。并且,果實(shí)總抗壞血酸(T-AsA)含量在花后0 d最高,達(dá)44.7 ng/g,此后呈下降趨勢(shì)?！窘Y(jié)論】在果實(shí)生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中,PacGalDH的表達(dá)量變化與T-AsA水平變化趨勢(shì)基本一致,初步推測(cè)PacGalDH可能是甜櫻桃AsA生物合成的關(guān)鍵酶。