摘要:【目的】探討白羽王鴿Columba livia骨骼肌衛(wèi)星細胞的分離、培養(yǎng)和鑒定的方法,建立完整的家鴿骨骼肌衛(wèi)星細胞的培養(yǎng)體系?!痉椒ā窟x擇孵化16d的鴿胚作為試驗材料,采用組織塊貼壁法和膠原酶消化法分離胸肌的骨骼肌衛(wèi)星細胞并繪制其生長曲線。待衛(wèi)星細胞分化出肌管后,采用免疫熒光法檢測肌球蛋白重鏈(MyHC)的表達;在細胞分化出肌管前、后分別提取總RNA,采用RT-qPCR方法檢測Desmin、Pax7、MyoG和MyoD1基因在細胞分化出肌管前、后的相對表達量?!窘Y(jié)果】組織塊貼壁法和膠原酶法均能成功地分離出骨骼肌衛(wèi)星細胞,其生長曲線呈“S”型;該細胞經(jīng)含體積分數(shù)為20%FBS的DMEM高糖培養(yǎng)液培養(yǎng)7d后視野中出現(xiàn)大量明顯可見的肌管,成肌特異性標(biāo)志MyHC表達呈陽性。RT-qPCR結(jié)果表明,Desmin和MyoG基因分化后的相對表達量分別是分化前的5.68和10.38倍,而Pax7和MyoD1基因分化前的相對表達量分別是分化后的7.01和5.51倍?!窘Y(jié)論】建立了鴿骨骼肌衛(wèi)星細胞的培養(yǎng)體系,為今后進行家鴿肌肉發(fā)育的研究提供細胞模型。
注:因版權(quán)方要求,不能公開全文,如需全文,請咨詢雜志社