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靶向沉默HIF-1α和Survivin基因對鼻咽癌裸鼠移植瘤放療敏感性的影響

作者:向少龍; 劉娟娟; 趙艷; 趙厚育 貴州醫(yī)科大學; 貴州貴陽550004; 貴州醫(yī)科大學分子生物學重點實驗室; 貴州貴陽550004; 貴州醫(yī)科大學附院耳鼻咽喉科; 貴州貴陽550004

摘要:目的:探討RNAi靶向沉默人鼻咽癌細胞株CNE-2細胞缺氧誘導因子-1α(HIF-1α)和/或生存素(Survivin)基因對裸鼠移植瘤放療敏感性的影響。方法:設計合成靶向沉默HIF-1α和/或Survivin的microRNA干擾質粒,采用脂質體轉染法將HIF-1α和/或Survivin的microRNA干擾質粒轉染到CNE-2細胞;取35只4~6周齡的雌性BALA/c裸鼠,隨機均分為HIF-1α干擾組、Survivin干擾組、HIF-1α&Survivin干擾組(聯(lián)合干擾組)、空載組和陰性對照組;分別給予相應轉染后的CNE-2細胞注射至裸鼠右側腋窩皮下,待各組裸鼠成瘤后,給予5Gy X-射線照射,每隔3 d放療1次,共15Gy X-射線,觀察各組裸鼠放療前后的腫瘤體積,照射結束3 d后處死裸鼠,測量瘤體體積,計算腫瘤體積增加率;RT-q PCR法檢測瘤體組織中的HIF-1α和Survivin mRNA表達水平,Western Blot法檢測HIF-1α和Survivin蛋白表達水平,TUNEL試劑盒檢測鼻咽癌裸鼠移植瘤中細胞凋亡。結果:HIF-1α干擾組、Survivin干擾組與聯(lián)合干擾組經過放射治療后腫瘤體積增加率明顯小于空載體組與陰性對照組(P〈0.05);HIF-1α干擾組、Survivin干擾組與聯(lián)合干擾組瘤體組織中HIF-1α、Survivin mRNA和蛋白質表達水平顯著低于空載組與陰性對照組,細胞凋亡率高于空載組與陰性對照組(P〈0.05);HIF-1α干擾組、Survivin干擾組及聯(lián)合干擾組瘤體組織中HIF-1α、Survivin mRNA和蛋白質表達水平及細胞凋亡率比較,差異無統(tǒng)計學意義(P〉0.05)。結論:單獨干擾HIF-1α、Survivin基因與聯(lián)合干擾HIF-1α和Survivin基因均能夠增加鼻咽癌裸鼠移植瘤對放療敏感性,但聯(lián)合干擾并沒有進一步提高鼻咽癌裸鼠移植瘤放療敏感性。

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貴陽醫(yī)學院學報

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