摘要:構(gòu)建了基于銀離子穩(wěn)定的剪刀形三螺旋分子開關(guān)的熒光傳感器,中性環(huán)境下快速靈敏檢測轉(zhuǎn)錄因子。銀離子促使剪刀分子信標的兩條臂(標記熒光基團的雙鏈臂和標記猝滅基團的單鏈臂)相互靠近,剪刀閉合,形成剪刀形三螺旋開關(guān)。轉(zhuǎn)錄因子不存在時,剪刀處于閉合,三螺旋開關(guān)"關(guān)閉",熒光基團和猝滅基團發(fā)生熒光共振能量轉(zhuǎn)移,熒光被猝滅。轉(zhuǎn)錄因子存在時,特異性結(jié)合包含在開關(guān)雙鏈臂中的雙鏈識別序列,取代單鏈臂,剪刀張開,三螺旋開關(guān)"打開",猝滅基團遠離熒光基團,熒光恢復(fù)。最佳條件下,轉(zhuǎn)錄因子濃度在0. 5~50 nmol/L范圍內(nèi),熒光強度與其濃度呈線性關(guān)系,檢測限0. 3 nmol/L。
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