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短小芽孢桿菌HB-3的分離鑒定及其淀粉酶的純化特性研究

作者:閻華; 王會; 于博; 黃升謀; 李云捷; 吳進菊 湖北文理學院化學工程與食品科學學院; 湖北襄陽441053; 襄陽市中心醫(yī)院; 湖北襄陽441053

摘要:從湖北省襄陽市三九釀酒廠下水道污泥分離篩選得到產(chǎn)淀粉酶菌株HB-3,根據(jù)菌株生長形態(tài)和生理生化特征分析,初步鑒定為短小芽孢桿菌。短小芽孢桿菌HB-3在淀粉培養(yǎng)基上培養(yǎng)72 h后,淀粉酶活力達到120.0 U/mL。然后使用DEAE-52和CM-52陰陽離子交換層析柱對短小芽孢桿菌HB-3產(chǎn)生的淀粉酶進行了部分純化。結(jié)果表明,短小芽孢桿菌HB-3中淀粉酶經(jīng)過部分純化后,純化倍數(shù)為5.9,酶活力回收率為90.9%。純化后的淀粉酶使用SDS-PAGE凝膠電泳研究,以標準蛋白為對照,計算出短小芽孢桿菌HB-3中淀粉酶分子量為56.5 kDa。同時對短小芽孢桿菌HB-3的淀粉酶進行了純化特性研究,結(jié)果表明,該酶的酶促反應最適溫度為50℃,40~60℃熱穩(wěn)定性良好;該酶的酶促反應最適pH為5.0,pH 4.0~6.0酸堿穩(wěn)定性良好,該酶對底物淀粉的反應動力學米氏常數(shù)Km為0.062 mmol/L,最大反應速率Vmax為3.019 mmol/(L·min)。

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